概述1
第一章微生物实验的无菌环境和操作5
第一节微生物实验的无菌环境5
一、无菌室5
二、超净工作台6
三、环境无菌检测的方法8
第二节微生物实验的无菌操作14
一、无菌操作前的准备工作14
二、灭菌和消毒方法14
第二章微生物实验的重要仪器23
一、普通光学显微镜23
二、高压蒸汽灭菌锅24
三、 移液器25
四、电子天平27
五、 pH计28
六、分光光度计29
七、超净工作台30
八、恒温培养箱30
九、摇瓶培养设备30
十、冰箱及超低温冰箱31
十一、离心机32
十二、真空冷冻干燥机33
十三、PCR仪34
十四、 厌氧培养箱35
十五、生物安全柜36
十六、电热恒温干燥箱37
第三章显微镜使用和形态学观察39
实验一普通光学显微镜的使用41
实验二暗视野显微镜的使用47
实验三相差显微镜的使用50
实验四微分干涉差显微镜的使用53
实验五荧光显微镜的使用56
实验六微生物大小测定59
实验七微生物的形态观察63
实验八微生物染色技术66
第四章微生物的培养、分离及生长72
实验九培养基的配制和高压蒸汽灭菌73
实验十微生物的接种分离和纯培养78
实验十一亨盖特法厌氧培养基的制备82
实验十二厌氧微生物的分离培养86
实验十三噬菌体的分离纯化和效价测定90
实验十四微生物的计数——血细胞计数法93
实验十五微生物的计数——平板活菌计数法96
实验十六比浊法测定细菌生长曲线99
实验十七干重和湿重法测定微生物的生长量102
第五章微生物遗传学技术104
实验十八微生物的诱变和突变株的筛选105
实验十九营养缺陷型突变株的选育108
实验二十菌种保藏技术112第六章分子生物学技术119
一、目的基因的获得119
二、载体系统的选择119
三、目的基因与载体的重组119
四、重组载体引入受体细胞120
五、重组受体细胞的筛选和鉴定120
六、目的基因在受体细胞内的表达120
实验二十一细菌总DNA的提取和琼脂糖凝胶电泳121
实验二十二基本PCR技术扩增DNA片段124
实验二十三碱裂解法和试剂盒法提取质粒DNA126
实验二十四DNA分子的限制性内切酶消化、片段纯化、连接130
实验二十五感受态细胞的制备133
实验二十六重组DNA转化宿主细胞135
第七章微生物检测和鉴定137
实验二十七微生物的营养及生理生化反应138
实验二十八应用API20E细菌鉴定系统鉴定肠杆菌科和部分其他革兰氏阴性杆菌142
实验二十九以细菌16S rRNA序列和真菌ITS序列为基础的菌种鉴定146
第八章微生物技术的应用150
实验三十土壤中纤维素分解菌的分离151
实验三十一食品样品中菌落总数的测定159
实验三十二食品样品中大肠菌群MPN值的测定161
实验三十三原生质体的制备167
实验三十四原生质体的融合169
附录Ⅰ常用染色液的配制171
附录Ⅱ常用培养基配方173
附录Ⅲ常用缓冲液的配制176
参考文献178