环境工程微生物学实验须知1
第一章环境工程微生物学基本实验技术2
第一节准备实验——接种工具与瓶塞及其使用2
一、接种工具2
二、瓶塞（过滤塞）4
第二节常用器皿及其包装5
一、常用玻璃器皿的种类、规格及使用5
实验11常用玻璃器皿的清洗和包装15
二、环境工程微生物学实验常用设备及使用17
第三节培养基及其配制22
一、培养基的种类22
二、培养基的配制24
实验12培养基的配制25
第四节消毒与灭菌技术27
一、湿热灭菌27
二、干热灭菌29
三、紫外灭菌29
四、过滤除菌29
实验13消毒与灭菌31
第五节接种与无菌操作技术33
一、接种概念33
二、无菌操作的概念33
三、接种与无菌操作的基本要求33
四、接种前的具体准备34
五、接种方法34
六、思考题37
第六节环境工程微生物的分离与纯化技术37
一、控制培养条件的方法37
二、菌落水平上的分离与纯化38
实验14纯种分离40
三、细胞水平上的分离与纯化42
第七节菌落形态观察与计数43
一、细菌和酵母菌菌落的异同点44
二、放线菌和霉菌菌落形态的异同点44
实验15微生物培养特征的观察45
第八节环境工程微生物显微技术46
一、普通光学显微镜47
实验16微生物形态的观察52
实验17显微镜直接计数与微生物悬滴观察53
实验18微生物细胞大小的测定55
二、暗视野显微镜57
实验19暗视野显微镜的使用及活菌体的观察58
三、相差显微镜59
实验110相差显微镜的使用及微生物（酵母）细胞内部结构的观察60
四、荧光显微镜61
实验111荧光显微镜的使用及微生物（酵母和细菌）形态结构的观察63
五、透射电子显微镜63
实验112透射电子显微镜微生物样品的制备与观察66
六、扫描电子显微镜69
实验113扫描电子显微镜微生物样品的制备与观察71
第九节微生物的制片与染色技术73
一、微生物制片技术73
二、微生物的染色技术74
三、细菌和放线菌的制片与简单染色技术76
实验114细菌和放线菌的制片、简单染色与形态观察76
实验115细菌荚膜、芽孢和鞭毛的制片、简单染色与形态观察77
四、霉菌和酵母菌的制片与简单染色技术79
实验116酵母菌和霉菌的制片、染色技术及形态观察79
实验117革兰染色80
第二章综合实验环境工程微生物的群体生长特性与培养技术83
实验21微生物生长曲线的制作（光电比浊计数法测定）83
实验22环境因素（pH、温度、渗透压、化学药物等）对微生物生长的影响85
实验23好氧微生物的培养90
实验24厌氧微生物的培养93
实验25病毒（噬菌体）的培养96
第三章研究性实验污染物降解菌的分离与活性测定技术100
实验31酚降解菌的分离与降解活性的测定100
实验32有机磷降解菌的分离与降解活性的测定102
实验33纤维素降解菌（产纤维素酶细菌）的分离与降解活性的测定104
实验34淀粉降解菌（产淀粉酶细菌）的分离与降解活性的测定107
实验35蛋白质降解菌（产蛋白酶细菌）的分离与降解活性的测定109
实验36石油降解菌的分离与降解活性的测定111
实验37氰化物降解菌的分离与降解活性的测定113
实验38硝化细菌的分离与硝化活性的测定116
实验39氨化细菌的分离与活性的测定119
实验310聚磷菌的分离与活性测定121
第四章环境工程微生物学应用研究型实验125
实验41微生物产沼气125
实验42微生物制氢129
实验43微生物制取酒精（酵母菌的乙醇发酵试验）132
实验44微生物吸附剂的制备136
实验45水中大肠菌群数的测定138
实验46利用Biolog自动分析系统分
离鉴定微生物菌群142
第五章环境工程微生物学现代分子实验技术146
实验51扩增片段长度多态性分析（AFLP）146
实验52限制性片段长度多态性分析（RFLP）150
实验53随机引物扩增多态性DNA分析（RAPD）151
实验54聚合酶链反应（PCR）154
知识拓展环境工程微生物菌种的保藏156
附录一常用培养基的配方161
附录二常用试剂和溶液的配制166
附录三常用染色液的配制170
附录四菌种保藏技术172
参考文献173