基因工程实验指导（第3版）（附数字课程） / iCourse·教材
作者： 朱旭芬
出版社：高等教育出版社
- 高等教育出版社
- 9787040439519
- 3版
- 86705
- 0045163381-2
- 工学
- 生物工程
- Q78
- 生物技术、生物工程
- 研究生、本科
本书配套数字课程（http://abook．hep.com.cn/43951）提供了与教材相结合的教学课件、教学视频、彩图、拓展性阅读材料、实验仪器、操作要点图片、实验结果图片及实验报告范本等资源，便于教师教学和学生学习使用。
本书适用于高等学校生物技术、生物工程、生物科学等相关专业本科教学使用，也可供从事基因工程教学、科研、生产的工作人员和研究生参考。
实验计划表
导论
第一节 基因工程的四大要素
第二节 基因克隆的策略
1 核酸的提取与检测
1—1 基因组DNA的提取
1—2 总RNA和mRNA的提取
1—3 噬菌体DNA的提取
1—4 质粒DNA的提取
1—5 核酸的检测
1—6 脉冲场凝胶电泳
1—7 宏基因组文库的构建
2 靶基因的获取
2—1 PCR扩增
2—2 目的基因片段的获取
2—3 探针的标记及检测
2—4 核酸探针筛选基因文库
2—5 反转录PCR
2—6 RACE方法
2—7 反向PCR
2—8 SiteFinding—PCR
2—9 功能基因的活性筛选
3 基因定点突变、沉默与敲除
3—1 基因定点突变
3—2 基因沉默技术
3—3 酵母基因的敲除
3—4 哺乳动物基因的敲除
3—5 植物基因的敲除
4 质粒的重组
4—1 T-A克隆
4—2 感受态细胞的制备
4—3 重组质粒的转化
4—4 阳性克隆的筛选
4—5 DNA序列测定与序列同源性分析
5 原核表达系统的构建与诱导表达
5—1 DNA的酶切反应
5—2 靶DNA片段的分离纯化
5—3 DNA片段的连接
5—4 表达质粒的构建
5—5 Soulhern印迹
5—6 靶基因的诱导表达
5—7 SDS-PAGE
6 真核表达系统的构建与表达
6—1 外源基因在酵母中的表达
6—2 外源基因在哺乳动物细胞中的表达
6—3 外源基因在植物细胞中的表达
6—4 qRT-PCR分析
6—5 Nor-thern印迹
6—6 Western印迹
6—7 荧光原位杂交
7 蛋白质的分析与目标产物分离
7—1 免疫荧光与激光共聚焦
7—2 双向电泳
7—3 酵母双杂交
7—4 蛋白质浓度的测定
7—5 亲和层析
参考文献
附录1 名词缩写
附录2 实验操作及仪器使用注意事项
附录3 如何撰写实验报告
附录4 常用碱基、氨基酸符号及缓冲液
附录5 大肠杆菌基因型
附录6 实验仪器
